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从脱气机出来的流动相进入高压泵许多情况下，泵的问题都反映在压力上，压力波动是常见的一类问题，泵的正常压力波动一般在2%以内，这个异常波动通常是由于气泡和盐引起的：如果流动相中的气泡没有被脱气机除掉，那么就会引起压力波动，通常我们可以通过重新 purge流和再脱气流来解决。由于盐引起的波动，主要是由于流动相中添加了浓度较高的缓冲盐，在含盐流动相和有机相中，盐会发生微小的析出，从而引起压力异常波动，解决这些问题可以考虑适当降低盐的浓度，或者用代替有机相。若因各种原因必须使用此流动相，可考虑在有机相中加入一定比例的水，然后适当提高梯度结束点。

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替代流动相的过程有时会发生在泵的使用过程中，取代流动相是指取代正相溶剂，或反过来取代溶剂的过程，这个过程重要的是与流动相的兼容性，常用的正反相色谱溶剂是不可互溶的，所以在更换中间，一定要用异冲洗系统，保证管路中所有原有的溶剂都被异取代。流程继续进行进样，进入进样器，进样器分为手动和自动两类。

泵用后不能及时清洗移动相中不得含有腐蚀性物质，含有缓冲液的流动相不能留在泵中，特别是当泵停泵过夜或更久时。若含有缓冲液的流动相留在泵中，可能会析出盐的微晶，如上述固体颗粒那样损坏密封环和柱塞，甚至只是因为溶液处于静止状态时，会析出。所以，必须用纯水将泵完全清洗干净，然后转换成适合于保存色谱柱和有利于泵维护的溶剂(对于反相键合硅胶固定相，可能是或-水)流相去空水泵工作时要注意防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则泵运转也会磨损柱塞、气缸或密封环，终造成泄漏。如果没有流动相的外流，没有压力指示怎么办？也许是泵内有大量的气体，此时可开启泄压阀，使泵在较大流量(如5 ml/min)下运转，排出气泡，也可用一个50 ml的针筒在泵出口协助抽气。另外一个可能的原因是密封环磨损需要更换。

不稳定的压力和流量其原因可能是需要排除的气泡；或单向阀内有异物，可卸下单向阀，浸入内超声清洗。有时候可以是砂滤棒内部出现气泡，或者被细小盐粒或滋生微生物部分堵塞，此时，可卸下砂滤棒浸入流动相超声除气泡，或将砂滤棒浸入稀酸(如4 mol/L)中迅速除去微生物，或将盐溶解，再立即清洗。为什么压力太大还是太低？也许是管道堵塞了，需要清理清理。另一种可能是由于管道出现了泄漏。检验阻塞或泄漏时，应逐段进行。采用梯度洗脱时，由于多种溶剂混和，组分不断变化，产生了一些特殊问题，必须引起足够的重视。PS:(在液相色谱中对成分复杂的样品，采用梯度洗脱法。在同一分析周期内，不停地改变流动相的浓度比例，称为梯度洗脱。这样，在一个复杂样品中，性质差异较大的组分，就能达到各自合适的容量因子 k的分离效果。

用不同的方法对色谱柱会有不同的要求，但是每一种色谱柱都有其清洁要求，这在色谱柱上可以找到，必须按照以上的要求来进行，否则会导致色谱柱效下降，色谱柱的使用寿命缩短，检测波长会因品种的不同而有不同的要求，这里需要指出的是要注意观察检测器灯能量的变化，如基线波动大，活性成分的响应值突然变小等，对检测器电镜能量的变化，要注意观察到检测器中能量的变化，如基线波动大，活性成分的响应值突然变小等，有可能是由于灯的能量不足导致的，所以实际使用时要根据实际情况更换。流动速度也因品种而异，一般为1.0 ml/min，流速不能随意改变，尤其作为 QC人员，但作为研发人员，有时为了摸索条件或进行方法耐用性验证，会改变流速来评估该方法的适用性。对不同品种的进样量也有不同的规定，进样量这个现在都是自动进样，所以进样精密度都是很好的，不用特别强调。

操作员：，作为液相操作人员，必须认真学习夜想说明书，掌握液相硬件和软件的操作，掌握日常维护，掌握基本故障的排除与维修。普通液相的操作规程也是由操作人员起草的，因此只要严格按照操作要求操作，一般都不会出现问题，当然对液相的日常维护维护来说，特别是对液相的日常维护保养来说，要注意的是液相的日常维护保养，泵密封垫的清洗、系统的清洗、溶剂过滤头的清洗等方面都不会出现问题，尤其是对液相的日常维护，不会造成不必要的麻烦。第二，操作者在配制液相分析样品时，好由同一人单独完成，以免不必要的意外误差。4、液体安装环境：仪表应尽量安装在水平位置，远离振动、电磁干扰的屋内，有条件时尽量把液相数据处理系统分开，一方面是防止色谱基线噪声太大、基线不稳等，一方面是为了减少对人体的危害。

“堵”的原因之三：操作不当。有下列几种常见问题：(1)更换部件时选择了错误的型号，或者管线材料不符合标准，接口不匹配，在拧紧时产生变形，使管路堵塞。(2)样品处理液净化不干净，造成六通阀与柱间的堵塞长期存在。(3)在使用手动六通阀时，有些人可能由于手劲小的原因，转动不到位，造成流道形成死堵，压力迅速上升超过警戒值.自动进样的情况类似，如果六通阀也会形成死堵，造成流道形成死堵，压力迅速上升超过警戒值.自动进样的情况类似，如果六通阀也会形成死堵，导致超压。

原因讲了不少，现在介绍一下查堵的方法。出现“堵”的现象后，要找出原因，主要是什么地方发生了“堵”。要注意的是，在大多数情况下，在整个系统中只有一处堵塞。查堵的方法是从尾部往前逆分段拆开，仔细观察压力值，如果有一个部件(除柱子外)上和下压差大，即基本可以判断出这种配件堵塞。对于柱塞问题，可通过更换相同规格的柱压是否一致来判断。推荐先换柱，看看压力是否仍然很大。接着为柱前管段，向前检查，依次检查。这里再谈一谈“漏洞”。在流动相瓶和废液瓶之间的液相色谱仪流道为全封闭系统，内压非常高，但外部可保证一滴不漏。假如有一个部件出现泄漏，那么问题就在这里。