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SCIEXLabs则花费了大量的时间进行多级方法验证，这是一项非常耗时的工作。为什麽这样不遗余力地去做验证这一工作，刘华芬觉得至初的想法和动力来自于她从临床市场中得到的启示。“六年前， SCIEX在临床医学市场上的生意并不红火，而我们的 LC/MS/MS/MS已经引i领了北美临床市场。

多年前，仪表操作人员对整体解决方案的需求开始出现，行业中也出现了一些方法。在真正的仪器使用者手中，这些方法总会暴露出各种各样的问题，不能称之为真正有效的“解决办法”，刘华芬发现了这一点，开始更加关注真实样品基质中的重现性。期望通过至新的样本处理技术，反复验证并持续改进，为用户提供真正的问题解决方法。如果验证和改进所用的时间能够使这个方案真正解决问题，那么花这么多时间是值得的。

很多次的试验证明确实能换来用户的信任，刘华芬转述了北美用户对 SCIEX解决方案的看法：“我知道你们的方法能帮助我成功，因此我们很乐意购买 SCIEX产品。现在，方法验证和方法开发一起被称为 SCIEXLabs的两个主要组成部分。

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当前高i效液相色谱高i效液相色谱高i效液相色谱生产厂家普遍采用四元数低压梯度(在线脱气)系统，但几年前大多采用了二元高压梯度。以往，四元数低压系统通常是进口仪器的产品。我国大部分厂家采用高压混合方式，没有低压系统的应用与发展。目前国内的一些招标项目中，低压四元数的选择也比较明显。多数顾客会误认为四元数低压是进口的***技术，但实际上四元数低压是对二元高压的补充，即当相数比例变化时，二元高压不能满足分析，四元数低压则不能满足。但是，如果不同比例的流动相数小于2，包括2，二元高压梯度系统在高精度分析中具有明显的优势。就目前的价格而言，四元低压泵并不比二元高压泵低很多，但是节省的费用也很大。

高i效液相色谱四级低压梯度系统是通过单泵加梯度比例阀来实现的，因为比例阀位于泵的前面，并且每个流道的溶剂在比例阀中混合，所以在泵的前后低压下混合。在常规分析中，低压四元数梯度可满足要求。若分析样品组成复杂，重复性高，或小流量下需梯度分析，宜选用高压梯度。德国 公司引进的四元高压梯度泵，解决了流动相数量有限的问题，同时又保证了高精度分析。

在分析型高i效液相色谱中，目前常用的进样阀是7725型进样阀，它的内部六通结构使进样阀的进样操作十分方便，但如果使用不当，也会造成麻烦。举例来说，在高i效液相色谱检测过程中，色谱峰异常和重复性较差的情况时有发生，这主要是由于使用方法不当造成的，要解决这类问题，需要从以下几个方面着手。

1、进样控制。当采用进样阀进样时，该阀的样品环是定量的(一般分析型进样阀的样品环体积为20 ul)，因为进样阀内的样品溶液在样品环的管道中有径向的速度梯度(即在普通分析进样阀的样品环体积为20 ul)。所以，要在样品环中填充样品溶液，从而用进样阀精i确定量，就必须使进样量大于样品环体积的2倍。若用注i射器控制进样量，至大只能注射样品环体积1/2的量，这样可以防止溢流管溢流而造成定量误差。

2、进样阀的清洗问题。若样品环上有至后一次进样时的残留物，则下一次注射样品一定会受到污染，为了防止这一现象的发生，应按照以下步骤进行： a.进样阀有两个位置： INJECT和 LOAD。先在 LOAD位置，用一个注i射器将流动相在进样阀中清洗几次，每次用量约为40 ul; b.然后将进样阀板手柄拧入 INJECT位置时，用流动相清洗几次，每次用量还为40 ul; c.至后，再将样品注入进样阀。

按以上步骤操作，可避免进样阀门造成的污染，从而消除干扰峰，提高分析结果的准确性。

在高i效液相色谱分析中，常采用和配制流动相。常用的高i效液相色谱法试剂至好是试剂，如色谱纯化试剂等。当要求不太严格时，纯级甚至是分析纯的试剂都可以使用。紫外检测器是常用的高i效液相色谱分析方法，因此，应从降低基线噪声和提高分析灵敏度的角度考虑，采用紫外吸收小、杂质少的纯紫外吸收剂。

1.过滤流动相。在使用前，准备好的流动相要用0.5 um口径的微孔滤膜进行过滤。因为溶液中含有许多用肉眼很难发现的微粒，如果不滤除它们，泵口、柱头上的过滤器就会堵塞，从而阻塞了流动相的正常通道，使色谱柱的阻力增大，柱效降低。遇到此情况时，换用过滤过的流动相，拆开堵塞过的过滤器，浸在20%的水溶液中，用超声波清洗机清洗20分钟，以除去滤片上的堵塞。

2、流动相的脱气。在使用之前，必须先除气，以便尽可能地去除溶解在流动相中的气体，否则，这些气体会使柱填料的性能下降，并对检测器的信号产生较大的干扰。目前，各种脱气方法有超声波脱气、真空脱气、氮气脱气等。目前应用至多的是真空脱气法和氮气流法。在无气状态下，水与混合时会产生大量的气泡，气泡会进入色谱柱和检测器中，影响分析工作的正常进行。