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发布时间:2021-12-11 02:30:00 作者:广州联方





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助推基因治i疗- SCIEX毛细管电泳多重表征综合应用方案:
通过在 DNA和 mRNA水平上对致病基因进行修正从而达到i效果,与传统药相比,对于一些不具药i效的靶点具有的优势,因此基因治i疗对特定基因引起的疾i病有很大的应用潜力,其中肿i瘤和罕见病是基因治i疗至主要的应用领域。基因治i疗药 Gendicine在中国于2004年被 FDA批准上市,成为世界上第i一个商业化的基因治i疗产品,这是世界上第i一个上市的基因治i疗产品。溶瘤病毒产品 Oncorine也于2005年在中国获批上市,目前已有300多种基因治i疗产品已经上市,或正在 FDA和 EMA的监管下进行研发,这些基因治i疗产品都涉及持续的编码蛋白质 DNA转移,利用多种体内外技术。
SCIEXP800 Plus药分析系统可广泛用于质粒 DNA纯度分析、腺相关病毒(AAV)、腺相关病毒(AAV)衣壳蛋白的纯度分析、腺相关病毒的等电点分析、宿主细胞残留 DNA的片段分布分析等多个方向
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近视是一种日益普遍的眼病,它会导致人们在观察远处物体时变得模糊。利用蛋白质组学技术,香港科学家对影响眼睛正常发育和导致近视的因素进行研究。
蛋白组学是指在特定疾病状态下所涉及到的大量蛋白质,并从中找到影响人类和动物正常发育的外部环境或遗传因素。香港科技大学视光学院副 利用蛋白质组学技术,对多种眼疾进行研究,特别是近i视眼。该人描述了他在实验室里如何利用 SCIEX仪器进行研究:“我大约15年前从香港理工大学毕业,拿到了博士。长期以来,我对近视的研究非常感兴趣,这是我攻读博士期间研究的重点。但是在这之前,我们完全了解了蛋白质组学以及这项技术能够为我们提供更深入的信息。蛋白质组学对很多临床研究非常有用,如近视、青i光眼、黄斑变性、i感i染等。在蛋白质组学的研究中,发现新蛋白质间的相互作用可能会给带来更好的方法,因此我决定要在这方面进行一次探索。”
“眼睛是这类蛋白质组研究的理想模型,我们可以将一只病眼与一只健康的眼睛直接进行比较,因为它们的遗传模式是相同的。研究期间,曾用2- D凝胶技术来分析动物眼睛里的蛋白质,这非常耗时。但是到那时,几乎没有其他方法可供选择,对利用蛋白质组研究近视的技术几乎一无所知。另外,某些组织类型(如眼液)不能使用凝胶技术,这限制了我们的工作。只是在几年之后,人们才开始从使用二维凝胶技术转向使用液相色谱-质谱法,这促使我在7年前左右购买了离子阱和MALDI-TOF质谱仪。遗憾的是,我没有时间去理解这个系统的复杂性,这使我在硬件和软件使用上遇到困难,导致蛋白质组学研究被搁置数年。但是这些都是在我接触 SCIEX之前发生的。
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敏感度是质谱的灵i魂,至适用于对微量混合物的分析,一般三重四极杆质谱仪所做的 MRM灵敏度至高,但当需要使用MS2进行谱库检索时,其化合物浓度通常会达到 ug/ml的水平,如果浓度很低,仅残留 ng/ml, MRM的灵敏度不够高,无法准确定性,怎么办?QTRAP?是 SCIEX公司在2002年推出的质谱技术 QTRAP?,可以说是非常酷的硬核技术, QTRAP?系列(Q1qLIT3,第三重质量分析器是线性离子阱 LIT),它既具有三重四极杆的功能,又具有离子阱质谱的功能,可组合使用,同时定性定量,即使浓度低于1 ng/ml,用 QTRAP生成的增强型MS2谱图,也能进行定性检索。
对完全未知物的定性分析有哪些?早些年,高精度质谱较少,而低分辨率质谱,如四极杆等,仍可通过同位素丰度比部分推算出分子式,加上前面提到的扫描模式,还有一台高精度质谱,如X500系列台式 QTOF高分辨质谱等,就更容易获得化合物元素组成,但是,这还不够,还需要配套的质谱结构解析软件和足够的结构解析软件(这里需要强调,我们强大的应用专i家团队,可以将知识传授给你,分享经验)。但是,单靠质谱学也是不够的,你可能还需要利用紫外光谱、红外光谱、核磁共i振、 X单晶衍射等技术进行协同研究。
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在高i效液相色谱分析中,常采用和配制流动相。常用的高i效液相色谱法试剂至好是试剂,如色谱纯化试剂等。当要求不太严格时,纯级甚至是分析纯的试剂都可以使用。紫外检测器是常用的高i效液相色谱分析方法,因此,应从降低基线噪声和提高分析灵敏度的角度考虑,采用紫外吸收小、杂质少的纯紫外吸收剂。
1.过滤流动相。在使用前,准备好的流动相要用0.5 um口径的微孔滤膜进行过滤。因为溶液中含有许多用肉眼很难发现的微粒,如果不滤除它们,泵口、柱头上的过滤器就会堵塞,从而阻塞了流动相的正常通道,使色谱柱的阻力增大,柱效降低。遇到此情况时,换用过滤过的流动相,拆开堵塞过的过滤器,浸在20%的水溶液中,用超声波清洗机清洗20分钟,以除去滤片上的堵塞。
2、流动相的脱气。在使用之前,必须先除气,以便尽可能地去除溶解在流动相中的气体,否则,这些气体会使柱填料的性能下降,并对检测器的信号产生较大的干扰。目前,各种脱气方法有超声波脱气、真空脱气、氮气脱气等。目前应用至多的是真空脱气法和氮气流法。在无气状态下,水与混合时会产生大量的气泡,气泡会进入色谱柱和检测器中,影响分析工作的正常进行。
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