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发布时间:2022-01-10 03:44:00 作者:广州联方





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作为一种新型的治i疗手段,基因治i疗已进入到临床阶段,目前已受到世界各i国的高度重视。在此过程中,目的基因需要导入到人体,起到治i疗作用。引进人体至受关注的方法是利用载体进行运输。
由于具有安全性好、寄主细胞宽、外源基因在体内表达时间长等特点,腺相关病毒(AAV)被认为是至有前景的基因转移载体之一,在基因治i疗和疫i苗研究中得到广泛应用。
为确保 AAV相关产品的安全性和质量,需要对 AAV衣壳蛋白进行纯度分析。但 AAV载体在开发初期,蛋白质含量极i少,甚至更少,这对研究者的分析工作提出了挑战。
采用SDS-PAGE法对银染法或红宝石染色法进行检测,虽然灵敏度较高,但操作复杂、费时。在毛细管电泳的基础上,发展出一种取代 SDS- PAGE的CE-SDS方法,该方法具有分辨率高、定量准确、重复性好、自动化程度高、速度快等优点。
SCIEX公司利用其多年积累的技术优势,研制了一种基于毛细管电泳的腺相关病毒(AAV)衣壳。
本方法的主要优点:
1、简单明了的样品制备程序
2、VP1, VP2, VP3分辨率极
3、病毒蛋白的CPA%(校正峰面积%)的RSD小于0.7%
4、样品浓度与吸光度的线性关系良好,R2 =0.9991
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在植物代谢的研究中,基于质谱的代谢组学研究已经成为一种非常成熟和重要的技术手段。正式会议第i一天下午的主题就是代谢组学。该主题的主持人是华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室的罗杰教i授;罗教i授近四年来在Nature Genetics、Nature Communicati、PNAS、Plant Cell、Molecular Plant等一系列高水平杂志上发表了10多篇植物次生代谢调控及代谢组学的研究工作。我们很欣喜地看到,每项工作中都有SCIEX QTRAP 4000的身影,被应用到代谢物或代谢通路的靶向定量分析中。在会议的报告上,来自大连化物所、澳大利亚墨尔本大学和日本国立遗传学研究所的演讲报告,都可以看到SCIEX的产品或解决方案为植物代谢组学研究做出的贡献。特别是来自日本的Masanori Arita教i授,正是他针对SCIEX在蛋白质组学领域zui***的SWATH定量技术,率i先开发出了更适合于代谢组学研究的版本——MS-DIAL软件(Nat Methods. 2015 Jun;12(6):523-6.)。
希望SCIEX能用全i面而强大的代谢组学方案,为植物研究领域的客户提供更多的帮助,更好的助力人类的科研事业。
应用贾彦波经常在用户实验室为用户解决仪器和方法的应用问题,在与 SCIEX仪器及方法使用者的交流和回访中,他发现“用户对 SCIEXLabs所提供的整体解决方案非常满意”,“能让仪器更有效地发挥作用”是用户普遍的反映。Nature Scientification of SecuritySystems实验室对应用 SCIEXLabs提供的信息是:“方法包中的 SOP很详尽、清晰,能很快地得到准确的数据,这正是我们所需要的。在中国农业科学院蔬菜花卉研究所,每天使用农残检测方案对大量样品进行检测,其实验室人员反馈:“方案帮助我们节约了方法开发时间。因为开发人员不足,方法开发比较费力,有些方法需要用到上半年。全盘接受的解决方案帮助我们提升了应用的速度。”
刘华芬还说:“不仅在中国,我们的解决方案在其他地区也很受欢迎。除中国外, SCIEXLabs及其方法在国际上迅速得到关注和认可。今年初, SCIEXLabs受美国食品与管理局(FDA)的邀请,为其生物药和官员进行 BioBA解决方案的应用培训。
刘华芬刚刚从美国 AOAC International (美国分析化学家协会)那里收到了一封贺信。SCIEXLabs以“食品中过敏原检测方法”为题获得 AOAC方法组委会大奖。这一年只有一套方法能获得成功, AOAC已经将该方法作为行业标准方法模板。今年九月,刘华芬将在美国达拉斯出席 AOAC130周年年会,并将在颁奖典礼上接受这个奖项。刘华芬表示:“很高兴看到 SCIEX作为 AOAC仪器制造商在学术上获得 AOAC的认可,同时也希望 SCIEX的解决方案能更好地应用于业界。
在高i效液相色谱分析中,常采用和配制流动相。常用的高i效液相色谱法试剂至好是试剂,如色谱纯化试剂等。当要求不太严格时,纯级甚至是分析纯的试剂都可以使用。紫外检测器是常用的高i效液相色谱分析方法,因此,应从降低基线噪声和提高分析灵敏度的角度考虑,采用紫外吸收小、杂质少的纯紫外吸收剂。
1.过滤流动相。在使用前,准备好的流动相要用0.5 um口径的微孔滤膜进行过滤。因为溶液中含有许多用肉眼很难发现的微粒,如果不滤除它们,泵口、柱头上的过滤器就会堵塞,从而阻塞了流动相的正常通道,使色谱柱的阻力增大,柱效降低。遇到此情况时,换用过滤过的流动相,拆开堵塞过的过滤器,浸在20%的水溶液中,用超声波清洗机清洗20分钟,以除去滤片上的堵塞。
2、流动相的脱气。在使用之前,必须先除气,以便尽可能地去除溶解在流动相中的气体,否则,这些气体会使柱填料的性能下降,并对检测器的信号产生较大的干扰。目前,各种脱气方法有超声波脱气、真空脱气、氮气脱气等。目前应用至多的是真空脱气法和氮气流法。在无气状态下,水与混合时会产生大量的气泡,气泡会进入色谱柱和检测器中,影响分析工作的正常进行。
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