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发布时间:2022-02-12 16:52:00 作者:广州联方





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人们开发了多种不同类型的质量分析仪,不仅试图提高质谱的分辨率和质量准度,而且还改进了质谱性能的其它特征,如速度、灵敏度和动态范围。比如,四极杆质量分析仪可以获得高灵敏度的目标采集,而四极离子阱提供了的全扫描灵敏度;但是这两个分析仪的质谱和质量准度都相对较低。与此相反,基于傅里叶变换离子回旋共振(FT-ICR)的质量分析仪,提供了极高的质谱分辨率和质量准度,其高质量分辨率是可以实现的,操作和维护也更为复杂;轨道阱傅里叶变换质谱分析器的发明,虽然简化了系统的操作和维护,但是仍然以采集速度为代价。
飞行时间质谱(TOF-MS)已成为多年来一种极具吸引力的技术选择。目前的TOF-MS技术很有潜力,并且在理论上具有大的质荷比(m/z),高速采集,的质量检测能力以及高灵敏度;事实上,TOF-MS技术诞生于1946年,当时,威廉·斯蒂芬斯(William Stephens)提出了在真空条件下的无场区域内,通过“飞行时间”来测量离子的质荷比(m/z)概念[2]。此后40多年的发展,包括反射和正交加技术的应用,极大地提高了TOF-MS的准度和分辨率;但是,它在获得高质量质谱数据方面仍缺乏能力。
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高i效液相色谱法概述:
高i效液相色谱 (高i效液相色谱)作为一种高i效、快速的分析分离技术,在上个世纪70年代得到迅速发展,是现代分离检测的重要手段。层析法的分离原理是:当溶解于流动相(mobile phase)的各组分通过固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和),其大小、强弱不同,在固定相中的滞留时间也不同,从而先后从固定相中流出。也叫色层法,色谱法。
高i效液相色谱是从经典的液相色谱方法发展而来,它以液体为流动相,并且采用了微粒细粒高i效固定相的柱层析分离技术。它的分离机理与普通的柱色谱一样,但填料更精细,需要高压泵推动,柱效高,分析速度快。在液相色谱中,流动相也参与了组分的分离过程,其组成、比例和 pH值可以灵活调整,分离方式多样。实践中,对不同样品进行分离,主要是通过改变流动相组成来调节样品在色谱柱的保留程度和选择性。
高i效液相色谱技术自上世纪60年代出现以来,由于采用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器,实现了对样品快速、高i效、灵敏的分离检测。高i效液相色谱技术的引入,使液相色谱吸收了经典液相色谱的发展经验,大大提高了仪器的自动化水平和分析精度。目前采用微处理器控制的液相色谱系统,不仅自动化程度高,而且可以控制仪器的操作参数(如溶剂梯度洗脱、流动相流量、柱温、自动进样、洗脱液收集、检测器功能等),同时还可以缩放、叠加得到的色谱图,并对保留的数据和峰高、峰面积进行处理等,为色谱分析工作者提供了一种、全功能的分析工具。
在分析型高i效液相色谱中,目前常用的进样阀是7725型进样阀,它的内部六通结构使进样阀的进样操作十分方便,但如果使用不当,也会造成麻烦。举例来说,在高i效液相色谱检测过程中,色谱峰异常和重复性较差的情况时有发生,这主要是由于使用方法不当造成的,要解决这类问题,需要从以下几个方面着手。
1、进样控制。当采用进样阀进样时,该阀的样品环是定量的(一般分析型进样阀的样品环体积为20 ul),因为进样阀内的样品溶液在样品环的管道中有径向的速度梯度(即在普通分析进样阀的样品环体积为20 ul)。所以,要在样品环中填充样品溶液,从而用进样阀精i确定量,就必须使进样量大于样品环体积的2倍。若用注i射器控制进样量,至大只能注射样品环体积1/2的量,这样可以防止溢流管溢流而造成定量误差。
2、进样阀的清洗问题。若样品环上有至后一次进样时的残留物,则下一次注射样品一定会受到污染,为了防止这一现象的发生,应按照以下步骤进行: a.进样阀有两个位置: INJECT和 LOAD。先在 LOAD位置,用一个注i射器将流动相在进样阀中清洗几次,每次用量约为40 ul; b.然后将进样阀板手柄拧入 INJECT位置时,用流动相清洗几次,每次用量还为40 ul; c.至后,再将样品注入进样阀。
按以上步骤操作,可避免进样阀门造成的污染,从而消除干扰峰,提高分析结果的准确性。
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