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SCIEXLabs则花费了大量的时间进行多级方法验证，这是一项非常耗时的工作。为什麽这样不遗余力地去做验证这一工作，刘华芬觉得至初的想法和动力来自于她从临床市场中得到的启示。“六年前， SCIEX在临床医学市场上的生意并不红火，而我们的 LC/MS/MS/MS已经引i领了北美临床市场。

多年前，仪表操作人员对整体解决方案的需求开始出现，行业中也出现了一些方法。在真正的仪器使用者手中，这些方法总会暴露出各种各样的问题，不能称之为真正有效的“解决办法”，刘华芬发现了这一点，开始更加关注真实样品基质中的重现性。期望通过至新的样本处理技术，反复验证并持续改进，为用户提供真正的问题解决方法。如果验证和改进所用的时间能够使这个方案真正解决问题，那么花这么多时间是值得的。

很多次的试验证明确实能换来用户的信任，刘华芬转述了北美用户对 SCIEX解决方案的看法：“我知道你们的方法能帮助我成功，因此我们很乐意购买 SCIEX产品。现在，方法验证和方法开发一起被称为 SCIEXLabs的两个主要组成部分。

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在高i效液相色谱分析中，常采用和配制流动相。常用的高i效液相色谱法试剂至好是试剂，如色谱纯化试剂等。当要求不太严格时，纯级甚至是分析纯的试剂都可以使用。紫外检测器是常用的高i效液相色谱分析方法，因此，应从降低基线噪声和提高分析灵敏度的角度考虑，采用紫外吸收小、杂质少的纯紫外吸收剂。

1.过滤流动相。在使用前，准备好的流动相要用0.5 um口径的微孔滤膜进行过滤。因为溶液中含有许多用肉眼很难发现的微粒，如果不滤除它们，泵口、柱头上的过滤器就会堵塞，从而阻塞了流动相的正常通道，使色谱柱的阻力增大，柱效降低。遇到此情况时，换用过滤过的流动相，拆开堵塞过的过滤器，浸在20%的水溶液中，用超声波清洗机清洗20分钟，以除去滤片上的堵塞。

2、流动相的脱气。在使用之前，必须先除气，以便尽可能地去除溶解在流动相中的气体，否则，这些气体会使柱填料的性能下降，并对检测器的信号产生较大的干扰。目前，各种脱气方法有超声波脱气、真空脱气、氮气脱气等。目前应用至多的是真空脱气法和氮气流法。在无气状态下，水与混合时会产生大量的气泡，气泡会进入色谱柱和检测器中，影响分析工作的正常进行。

高i效液相色谱高压泵的重要性和用户对高压泵的具体要求如下：

(1)流量可连续调节，流量范围宽

当前国际上 高i效液相色谱使用的高压泵，大部分流量可达到0.001-10.0 mL/min (制备色谱的流量较大，有时需要达到数千 mL/min)，可同时满足各种不同内径色谱柱的分析工作需求。

(2)良好的流动重复性。

大量 高i效液相色谱可使泵的流量重复性达到0.07%(RSD)。但重复性与检测方法有关，国际上一般采用两种方法来检测：一种是重量法，将泵单位时间内流出液，在天平上直接称重，判断重复性；另一种是保留时间法，根据保存时间的长短判断流量的重复性。对 高i效液相色谱进行分析时，通常以保留时间作为定性分析。高电压泵的重复性(RSD)是一个极为重要的指标，也是影响整个系统重复性的一个非常重要的性能技术指标。

(3)体积小。

高电压泵死量会影响 高i效液相色谱的分析精密度和准确度，尤其是对梯度洗脱的影响，通常都希望死体积越小越好。由于高压泵体积小，有利于快速置换溶剂，并有利于及时排出系统中的气泡。