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汕尾SCIEX耗材南区总代理服务至上「广州联方」

发布时间:2022-03-19 03:03:00        作者:广州联方







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近视是一种日益普遍的眼病,它会导致人们在观察远处物体时变得模糊。利用蛋白质组学技术,香港科学家对影响眼睛正常发育和导致近视的因素进行研究。

蛋白组学是指在特定疾病状态下所涉及到的大量蛋白质,并从中找到影响人类和动物正常发育的外部环境或遗传因素。香港科技大学视光学院副 利用蛋白质组学技术,对多种眼疾进行研究,特别是近i视眼。该人描述了他在实验室里如何利用 SCIEX仪器进行研究:“我大约15年前从香港理工大学毕业,拿到了博士。长期以来,我对近视的研究非常感兴趣,这是我攻读博士期间研究的重点。但是在这之前,我们完全了解了蛋白质组学以及这项技术能够为我们提供更深入的信息。蛋白质组学对很多临床研究非常有用,如近视、青i光眼、黄斑变性、i感i染等。在蛋白质组学的研究中,发现新蛋白质间的相互作用可能会给带来更好的方法,因此我决定要在这方面进行一次探索。”

“眼睛是这类蛋白质组研究的理想模型,我们可以将一只病眼与一只健康的眼睛直接进行比较,因为它们的遗传模式是相同的。研究期间,曾用2- D凝胶技术来分析动物眼睛里的蛋白质,这非常耗时。但是到那时,几乎没有其他方法可供选择,对利用蛋白质组研究近视的技术几乎一无所知。另外,某些组织类型(如眼液)不能使用凝胶技术,这限制了我们的工作。只是在几年之后,人们才开始从使用二维凝胶技术转向使用液相色谱-质谱法,这促使我在7年前左右购买了离子阱和MALDI-TOF质谱仪。遗憾的是,我没有时间去理解这个系统的复杂性,这使我在硬件和软件使用上遇到困难,导致蛋白质组学研究被搁置数年。但是这些都是在我接触 SCIEX之前发生的。

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高i效液相色谱高i效液相色谱常见类型有哪些?

其中两种至常见的高i效液相色谱为正相高i效液相色谱和反相高i效液相色谱。

正相高i效液相色谱:

柱子中填充微粒二氧化硅和非极性溶剂,如正己烷。一个典型的柱长在150到250 mm之间,其内径小于4.6毫米。由于极性化合物在极性二氧化硅表面的粘附时间较长,混合物中的非极性化合物通过色谱柱的速度加快。

反相高i效液相色谱:

在柱子中填充二氧化硅粒子,并对其进行改性,使长碳氢链(8~18个 C原子)附着在表面,从而达到非极性。用极性溶剂,如水、醇、甲i醇等。因为在极性溶剂和极性分子之间有很强的吸引作用,混合物中的极性化合物会更快地穿过色谱柱。在通过色谱柱时,非极性分子的速度减慢。他们对烃基的吸引主要是通过范德华分散力和疏水作用产生不同程度的吸引。其在流动相中的溶解度也较低,这有助于它们与烃基的相互作用。

反相高i效液相色谱是目前使用至广泛的高i效液相色谱技术。




在分析型高i效液相色谱中,目前常用的进样阀是7725型进样阀,它的内部六通结构使进样阀的进样操作十分方便,但如果使用不当,也会造成麻烦。举例来说,在高i效液相色谱检测过程中,色谱峰异常和重复性较差的情况时有发生,这主要是由于使用方法不当造成的,要解决这类问题,需要从以下几个方面着手。

1、进样控制。当采用进样阀进样时,该阀的样品环是定量的(一般分析型进样阀的样品环体积为20 ul),因为进样阀内的样品溶液在样品环的管道中有径向的速度梯度(即在普通分析进样阀的样品环体积为20 ul)。所以,要在样品环中填充样品溶液,从而用进样阀精i确定量,就必须使进样量大于样品环体积的2倍。若用注i射器控制进样量,至大只能注射样品环体积1/2的量,这样可以防止溢流管溢流而造成定量误差。

2、进样阀的清洗问题。若样品环上有至后一次进样时的残留物,则下一次注射样品一定会受到污染,为了防止这一现象的发生,应按照以下步骤进行: a.进样阀有两个位置: INJECT和 LOAD。先在 LOAD位置,用一个注i射器将流动相在进样阀中清洗几次,每次用量约为40 ul; b.然后将进样阀板手柄拧入 INJECT位置时,用流动相清洗几次,每次用量还为40 ul; c.至后,再将样品注入进样阀。

按以上步骤操作,可避免进样阀门造成的污染,从而消除干扰峰,提高分析结果的准确性。



高i效液相色谱高压泵的重要性和用户对高压泵的具体要求如下:

(1)流量可连续调节,流量范围宽

当前国际上 高i效液相色谱使用的高压泵,大部分流量可达到0.001-10.0 mL/min (制备色谱的流量较大,有时需要达到数千 mL/min),可同时满足各种不同内径色谱柱的分析工作需求。

(2)良好的流动重复性。

大量 高i效液相色谱可使泵的流量重复性达到0.07%(RSD)。但重复性与检测方法有关,国际上一般采用两种方法来检测:一种是重量法,将泵单位时间内流出液,在天平上直接称重,判断重复性;另一种是保留时间法,根据保存时间的长短判断流量的重复性。对 高i效液相色谱进行分析时,通常以保留时间作为定性分析。高电压泵的重复性(RSD)是一个极为重要的指标,也是影响整个系统重复性的一个非常重要的性能技术指标。

(3)体积小。

高电压泵死量会影响 高i效液相色谱的分析精密度和准确度,尤其是对梯度洗脱的影响,通常都希望死体积越小越好。由于高压泵体积小,有利于快速置换溶剂,并有利于及时排出系统中的气泡。





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